一、课程基本属性
实验课程编码：
1100420
实验课程中文名称：
微生物学实验
实验课程英文名称：
Experiment of Microbiology
实验课程类别：
专业基础教育
实验课程性质：
核心课程实验
总学时/学分：
32学时/2.0学分
实验学时/学分：
开课单位：
生命科学学院
开设学期：
第4学期
适用专业及类型：
生物技术专业（复合应用）、生物科学专业（卓越型）
先修课程：
生物化学
主撰人：
李蘅
主审人：
冯福应
制定时间：
2017年5月20日
二、课程简介与教学目标
（一）课程简介
本课程是微生物学的配套课程，它与微生物学理论课紧密结合，是生物工程、制药工程专业的基础实验课程，主要包括微生物染色与形态观察、培养基制备、微生物的培养、微生物生理生化等。
（二）教学目标
通过本课程的教学应实现以下目标：
——了解该课程的基本理论，先进的技术和方法
——熟悉该课程课堂讲授的有关微生物学理论知识
——掌握该课程实验技术的基本操作和技能
同时通过实验，培养学生观察、思考、分析问题和解决问题和提出问题的能力，培养学生的动手能力和创新能力，养成实事求是，严肃认真的科学态度，以及敢于创新的开拓精神。为学生今后从事教学、科研或企事业单位的食品检验以及新技术的研发工作打下扎实的基础。
三、实验项目与学时分配
表1 实验项目与学时分配表
序号
实验项目名称
学时分配
实验类别
实验类型
每组人数
要求
1
实验室环境和人体表面微生物的检查
3
专业类
验证性
3-4
必做
2
普通光学显微镜的使用及微生物形态观察
细菌的简单染色及革兰氏染色
4
霉菌形态观察及菌体大小的测定
5
酵母菌形态观察和微生物直接计数法
6
微生物的分离与筛选
7
综合性
自主设计实验
10
5-6
8
大肠菌群的测定
选做
实验技能综合测试
合计
32
四、实验条件
表2 实验主要设备和台件数
实验项目
设备名称
每组应配台件数
备注
生化培养箱
普通光学显微镜
人均一台
高压灭菌锅、超净工作台、生化培养箱、电子天平、磁力搅拌器、酸度计
高压灭菌锅、超净工作台、生化培养箱、电子天平、磁力搅拌器、酸度计、台式冷冻离心机、台式离心机、精密分光光度计、超低温冰箱、电泳仪PCR仪
五、实验内容及要求
实验项目（一） 实验室环境和人体表面微生物的检查
1．实验项目内容
（1）比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量与类型。
（2）观察不同类型微生物的菌落形。
（3）体会无菌操作的重要性。
2．基本要求
（1）了解微生物学实验技术的特殊性，以及进行实验的必备条件。
（2）理解、熟悉微生物无菌操作的重要性。
（3）掌握不同场所微生物的菌落形态特征。
实验项目（二） 普通光学显微镜的使用及微生物形态观察
光学显微镜油镜的使用，微生物永久装片的观察。
（1）了解不同类型的显微镜。
（2）理解细菌、放线菌、酵母菌及霉菌的形态特征和相互区别，根据所要观察微生物的情况选择适当的光学显微镜。
（3）掌握微生物的基本形态；细菌基本结构及鞭毛、芽孢、荚膜等特殊结构。掌握油镜的原理和使用技术。
实验项目（三） 细菌的简单染色及革兰氏染色
学习微生物涂片、染色的基本技术，对2种细菌进行简单染色和革兰氏染色观察。
（1）了解细菌革兰氏染色的应用及意义。
（2）理解细菌革兰氏染色机理，巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
（3）掌握微生物的制片及简单染色、细菌革兰氏染色的基本技术。
实验项目（四） 霉菌形态观察及菌体大小的测定
青霉分生孢子的观察、黑曲霉分生孢子和足细胞的观察、黑根霉假根和孢囊孢子的观察，总状毛霉孢囊孢子的观察。学习使用测微尺测定微生物大小的方法。
（1）了解霉菌的生殖方式。
（2）理解霉菌产生的各种孢子及在微生物分类鉴定中的作用。
（3）掌握霉菌的观察方法，测微尺的校准方法。
实验项目（五） 酵母菌形态观察和微生物直接计数法
酿酒酵母、假丝酵母的形态观察；酿酒酵母出芽生殖，子囊孢子观察（有性生殖）；酵母菌总菌数的计算。
（1）了解酵母菌的生殖方式，血细胞计数板计数的原理。
（2）理解酵母菌产生的各种孢子及在微生物分类鉴定中的作用。
（3）掌握酵母菌的观察方法，使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。
实验项目（六） 微生物的分离与筛选
培养基的设计、配制与灭菌，无菌操作练习（倒平板、划线接种），稀释涂平板法、划线法分离纯化微生物，细菌、放线菌、霉菌等菌落特征观察与分辨，目的菌的筛选分离，根据平板上菌落数对样品中微生物进行计数。
（1）了解培养基的种类及应用、无菌操作的意义及在各领域的应用、微生物计数与纯化方法。
（2）理解培养基设计的基本原理、消毒和灭菌的主要方法、稀释涂平板法、划线法分离纯化微生物的基本原理和应用范围、微生物菌落特征在分类鉴定中的作用。
（3）掌握培养基的配制方法、培养基的高压蒸汽灭菌、微生物无菌操作技术的实验方法、微生物分离纯化基本实验方法以及细菌、放线菌、霉菌等菌落特征。
实验项目（七） 自主设计实验
实验项目内容
1．确定实验方案：每组同学根据兴趣，结合实验室条件，设计一个分离具有某种特定功能或特殊意义的微生物菌株的实验方案。
2．目的菌的分离筛选和纯化：结合土壤微生物分离纯化、获得自己的目的菌种。
3．目的菌的分类鉴定：应用16S r DNA 序列分析方法对自己所分离的菌株进行分子水平的分类鉴定。
4．书写小论文和总结汇报：每组委派一名同学汇报自己的自主设计实验。
实验项目（八） 大肠菌群的测定
选做实验，根据自己的兴趣，利用业余时间在微生物学实验室自己完成。
六、实验报告
实验报告包含的内容有：实验名称、实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果等。
七、考核办法和成绩评定
（一）考核方式考试，闭卷。
（二）成绩评定
课程总评成绩＝基础实验成绩×40％＋自主设计实验成绩×60％
基础实验包括5次实验和一次实验考试，考试包括实验理论和实验操作两个部分；自主设计实验包括实验方案、完成实验、论文、总结报告四个环节。
八、推荐教材、参考书及网络资源
（一）教材
沈萍，陈向东主编．微生物学实验（第四版）．高等教育出版社，2007．
（二）参考书
周德庆主编．微生物学实验教程（第二版）．高等教育出版社，2006．
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